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抗體純化用親和層析填料
抗體是一種結構復雜的糖蛋白。即使是天然抗體,其結構也是各不相同??贵w類藥物在其生產(chǎn)工藝(培養(yǎng)、分離純化)或貯存過程中容易導致產(chǎn)品的不均一性,所以在藥物研發(fā)以及純化、生產(chǎn)過程中,對抗體藥物的定量和定性的分析時非常重要的。
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??????? Protein A是一種金黃色葡萄球菌細胞壁蛋白質,能特異性地與人和哺乳動物抗體(主要是IgG)的Fc區(qū)結合。因而,將Protein A 與層析介質以一定的方式結合,可制備用于抗體純化的親和填料。
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早期的Protein A柱結合的都是天然Protein A。天然Protein A5IgG結合域和其它未知功能的非Fc結合域組成,分子量約42KDa,結構如下圖所示。這種柱子對IgG的親和能力很強,可以吸附大量的lgG。但同時,天然Protein A的其他非結合域會和非目標蛋白結合,這樣被洗脫下來的蛋白質純度不夠,會影響到后續(xù)的試驗。


產(chǎn)品特點
?

產(chǎn)品

目標配體

粒徑(μm

每毫升結合量

應用

pH穩(wěn)定性

工作(清洗)

最高流速

cm/h

rProtein A

Sepharose FF

6mg重組Protein A

60-165

50mg人類IgG

30mg小鼠IgG

是實驗室和工業(yè)規(guī)模從細胞培養(yǎng)純化和回收抗體的理想選擇

3-102-11

300

nProtein A

Sepharose 4FF

6mg Protein A

45-165

35 mg人類IgG

抗體純化,無任何動物衍生組分

3-92-10

300

rmpProtein A

Sepharose 4FF

6mg重組Protein A

60-165

35 mg人類IgG

低脫落、一步高純度純化單抗和多抗

3-102-11

300

Protein A

Sepharose CL-4B

2-3 mg Protein A

45-165

16-25mg人類IgG

2mg小鼠IgG

純化體液或細胞培養(yǎng)液中的免疫球蛋白

3-92-10

150

Protein G

Sepharose 4FF

2 mg

蛋白G

45-165

24mg人類IgG

23mgIgG

17mg天竺鼠IgG;19mg山羊IgG;

7mg大鼠IgG10mg小鼠IgG

3-92-9

400

GammaBind G

Sepharose

-

45-165

17mgIgG

結合來自人、小鼠、大鼠的所有IgG亞基,結合來自豚鼠、山羊、牛、綿羊和馬的所有IgG。

3-92-9

130

-

GammaBind Plus

Sepharose

-

45-165

20mgIgG

增加大鼠和小鼠單抗的載量(還有人、牛、綿羊、馬、兔和山羊)

3-92-9

130

-

KappaSelect

11 mg Fab/ml

75

-

主要特異性吸附抗體的Fab,或純化Fab融合蛋白

3-10

600

IgSelect

S.Cerevisiae產(chǎn)生的重組的14kD蛋白

75

17mg/min

(在2.4min保留時間內)

特異純化人類IgG,能結合人類IgG的所有亞型,包括IgG3

2-11(長期)

1-13(短期)

600

Capto L

10mg/ml

85

25mg人類 Fab

純化廣泛的抗體片段,例如Fabs,單鏈可變區(qū)片段(scFv)和區(qū)域抗體(Dabs),包括kappa的輕鏈

2-10

500cm/20cm柱床


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